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Arq. ciências saúde UNIPAR ; 17(1): 15-18, jan.-abr. 2013. tab, ilus
Article in Portuguese | LILACS | ID: lil-761421

ABSTRACT

Diagnóstico quanto à presença de microrganismos patogênicos nos alimentos é indispensável para garantir a qualidade e a segurança alimentar. Registros epidemiológicos oficiais apontam a Salmonella sp. como um dos principais microrganismos causadores de doenças de origem alimentar no estado do Paraná. Portanto, vale ressaltar a importância da verificação de presença/ausência deste patógeno nos alimentos. As técnicas microbiológicas convencionais possuem custo e tempo de execução elevado. Em contrapartida, o diagnóstico molecular é inovador, de alta sensibilidade e especificidade, tendo como principal vantagem a redução do tempo da análise. O presente trabalho tem como objetivo realizar diagnóstico molecular por meio da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) para sorotipo de salmonela, com sua cultura padrão. Para tanto, cepas de Salmonella choleraesuis, Salmonella gallinaru; e Salmonella enteritidis foram repicadas em caldo nutriente, incubadas a 37ºC e após 24 horas realizou-se a extração de DNA utilizando o método de fenol/clorofórmio, seguida da sua amplificação, a qual foi satisfatória para a detecção do gene InvA, observou-se que a temperatura de hibridização ideal foi de 57°C. A realização desta metodologia e favorável por poder ser realizada de forma rápida e específica.


Diagnosis regarding the presence of pathogenic microorganisms in food is essential to ensure its quality and safety. Official epidemiological records define Salmonella sp. as one of the main microorganisms responsible for foodborne illnesses in the state of Paraná. Therefore, it is worth highlighting the importance of checking for the presence/absence of this pathogen in food. Conventional microbiological techniques are costly and time-consuming. On the other hand, molecular diagnosis is innovative, with a high sensitivity and specificity, as well as decreasing the analysis time, which is the main advantage of this approach. The present work aims to perform molecular diagnosis using Polymerase Chain Reaction (PCR) for Salmonella serotype with its standard culture. In order to do this, strains of Salmonella choleraesuis, Salmonella gallinaru and Salmonella enteritidis were replicated in nutrient broth and incubated at 37°C. After 24 hours, DNA was extracted using phenol/chloroform method, followed by its amplification, which was satisfactory for the detection of the InvA gene, with 57°C being the optimal hybridization temperature. This methodology showed positive outcome since it can obtain fast and specific results.


Subject(s)
Salmonella , DNA , Pathology, Molecular
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